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龙眼花芽ANS基因的克隆与原核表达
游向荣1,2, 许鸿川2, 梁文裕2, 陈清西3, 郑少泉4, 陈伟1,2
1.福建农林大学作物遗传育种与综合利用教育部重点实验室;2.福建农林大学生命科学学院;3.福建农林大学园艺学院;4.福建省农业科学院果树研究所
摘要:  运用蛋白质组学比较龙眼(Dimocarpus longan Lour.)正常成花和成花逆转花芽的蛋白质组变化,结果表明,ANS蛋白(anthocyanidin synthase)在龙眼成花逆转花芽中下调表达。应用 RACE方法克隆ANS蛋白的全长cDNA,长度为1477 bp,包括1个1071 bp的开放阅读框,编码357 bp的氨基酸序列,GenBank的登录号为FJ479616(GI:218202927)。将ANS在大肠杆菌中表达,获得1个约46 kD的外源蛋白。这说明ANS蛋白在龙眼成花逆转过程中起作用。
关键词:  龙眼  成花逆转  差异蛋白  ANS  克隆  表达
DOI:10.3969/j.issn.1005-3395.2010.3.2396
分类号:
基金项目:国家自然科学基金项目(30571293);教育部博士点基金项目(200803890009);福建省自然科学基金项目(2007J0045)
Cloning and Prokaryotic Expression of Longan ANS Gene
YOU Xiang-rong1,2, XU Hong-chuan2, LIANG Wen-yu2, CHEN Qing-xi3, ZHENG Shao-quan4, CHEN Wei1,2
1.Key Laboratory of Crop Genetics and Multipurpose Utilization, Ministry of Education, Fujian Agriculture and Forestry University;2.College of Life Science, Fujian Agriculture and Forestry University;3.College of Horticulture, Fujian Agriculture and Forestry University;4.Fruit Research Institute, Fujian Academy of Agriculture Science
Abstract:  The changes in proteome of normal flower and floral reversion buds in longan (Dimocarpus longan Lour.) were studied by using Proteomics method. The results showed that ANS (anthocyanidin synthase) protein was found down-regulated expression in floral reversion buds. ANS cDNA was obtained (GenBank access number: FJ479616) by using RACE method, its full length was 1477 bp, with a 1071 bp open read frame. ANS gene was expressed in E. coli, and a 46 kD heterologous protein was obtained. It suggested that ANS protein play a role in floral reversion in longan.
Key words:  Longan  Floral reversion  Differential protein  ANS  Clone  Expression

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